Hefðbundin súlu litskiljun
2.Chromatographic dálkur (Tegund snúnings)
3. Chromatographic dálkur (handbók)
*** Verðskrá fyrir heild hér að ofan, spyrjast fyrir um að fá
Lýsing
Tæknilegar þættir
Hefðbundin súlu litskiljunNotar mismuninn á dreifingarhlutföllum mismunandi efna milli kyrrstæðra fasa og farsíma áfanga, eða mismunandi varðveisluhæfileika fastra áfanga miðað við mismunandi efni, til að ná fram aðgreiningu efnis. Þegar blandan rennur í gegnum litskiljunarsúluna með farsíma fasanum mun hún hafa samskipti við kyrrstæða fasa í súlunni (svo sem upplausn, aðsog osfrv.). Vegna munar á eðlisfræðilegum og efnafræðilegum eiginleikum og mannvirkjum hvers íhluta í blöndunni, er stærðargráða og styrkur samskipta þeirra við kyrrstæða áfanga einnig breytilegur. Undir sama drifkraft er varðveislutími hvers íhluta í kyrrstæðum áfanga mismunandi, þannig að íhlutirnir í blöndunni streyma út úr súlunni í ákveðinni röð og ná aðskilnað.
Færibreytur
Greining skordýraeiturs leifar
 |
 |
 |
 |
Við segjum það oftHefðbundin súlu litskiljuner í raun aðgreining á litskiljun, einnig þekkt sem súlu litskiljun. Það var fyrst fundið upp og notað af rússneskum vísindamönnum árið 1903. Það muldi lausn af plöntu litarefnum í kalsíumkarbónatduft og fann mismunandi litaslóð á kalsíumkarbónatdufti frá toppi til botns. Með því að aðgreina og vinna úr mismunandi litum voru tiltölulega hrein blaðgrænu, lútín osfrv.
Eftir hundrað ára þróun hefur þessi aðferð orðið tiltölulega þroskuð og kyrrstæður fasinn hefur einnig þróast úr einu kalsíumkarbónatdufti í súrál (sem hægt er að skipta í súrt, hlutlaust, basískt), kísilgel, virkt kolefni osfrv. Meðal kísilgel er algengasta silica gel!
Yfirleitt þarf að hreinsa og virkja kyrrstöðufasa (kísilgel) og agnastærðin ætti að vera einsleit. Fræðilega séð, því minni sem agnastærðin og því stærra er yfirborðið á hverja einingarmassa, því hærra er aðsogsgeta og því betri aðgreiningaráhrif.
Hins vegar, í hagnýtri notkun, þegar festu fasa agnirnar eru of litlar, eru oft tvær aðstæður: Ein er sú að þær eru léttari að þyngd og fljóta auðveldlega í loftinu (kísilgel er ekki hægt að brjóta niður af mannslíkamanum og það fínni, því eitruðara er það); Í öðru lagi geta litlar agnir einnig leitt til lítilla eyður milli agna, sem leiðir til hægs leysisrennslishraða og tímaneyslu; Með því að taka kísill sem dæmi er stærsta viðskiptalegt stærð kísills nú 200-300 möskva.
Hvað varðar aðferðir sem fara framhjá dálki, auk sjálfvirkra greiningarbúnaðar, svo sem framsóknar, framsóknar, skilvirkan vökvafasa og súlur sem eru nefndar áðan, er handvirkt dálkur sem liggur aðallega skipt í þrjár gerðir: andrúmsloftsþrýstingsdálkur sem liggur, þunglyndissúla sem liggur og dálkur þrýstings.
Meðal þeirra leiðir þunglyndin í gegnum súluna til lélegrar aðsogs skilvirkni vegna hraðrar rennslishraða skolunarinnar, sem leiðir til þess að mest af fjölda bakka og lélegrar skilvirkni aðskilnaðar. Það er hentugur til að aðgreina sýni með tiltölulega opnum TLC plötum, sérstaklega fyrir sýni með aðeins einn stóran skautunar óhreinindi í vörunni; Mestum tíma sínum er varið í formeðferð efnasambanda og fjarlægir nokkur óhreinindi áður en vandlega hreinsun. Það skal tekið fram að uppgufun leysis af völdum neikvæðs þrýstings við notkun getur leitt til þéttingar mikils fjölda vatnsdropa á ytra yfirborði súlunnar. Ekki er auðvelt að reyna vatnsnæm efnasambönd.
Andrúmsloftsþrýstings súla sem liggur við er áhrifaríkasta aðskilnaðaraðferðin meðal þriggja, en vegna þess að leysirinn hreyfist oft of hægt, getur jafnvel bestu aðskilnaðaráhrifin haft áhrif á skilvirkni. Þess vegna er þrýstingi venjulega beitt á þessum tíma, sem kallast þrýstingur dálkur sem liggur; En þrýstingurinn ætti ekki að vera of hár. Almennt er tvöfaldur keðjukúla notuð til handvirkrar notkunar og fiskdæla er notuð til sjálfvirkrar notkunar. Báðum er hægt að breyta eins og sýnt er á myndinni.
Hefðbundið ferli á dálki:
Undirbúningur ætti að vinna vel:
Þegar þú velur dálk skaltu fylgjast með því hvort það er slípborð. Mundu að fylla botninn fyrir súlur án þess að slíta borð með smá bómull. Bómullin ætti ekki að vera of þykk eða of þunn, svo framarlega sem hún getur hindrað kísillinn frá því að koma af stað. (Bloggarinn tók í sundur föt hanger og notaði hann til að setja bómull í útrásina í tappann)
Undirbúðu lágmarks skautun skolun, UV lampa (mælt með fyrir rannsóknarstofu, lófatölvu, tilbúin til að taka ljósmynd hvenær sem er), þrýstibúnað og prófunarrör eftir þörfum!
Veldu viðeigandi dálk, bættu við kísill hlaupi, leggðu í bleyti kísill hlaupið og fletjið það
Valið áHefðbundin súlu litskiljuner mjög mikilvægt og reikna skal stærð þeirra út frá vöru magni, sem almennt er hægt að skipta í:
Nokkur milligrömm af súlunni (lokavalið fyrir heildarmyndun);
Dálkur með nokkrum tugum af milligrömmum (aðferðafræðileg stækkun undirlag);
500 milligrömm til 1 gramm af dálki (með aðferðafræði sem hráefni);
Súlur í kringum 5g og stærri vog.
Algengasta hlutfall dálkaþvermáls og hæðar á rannsóknarstofunni er venjulega á milli 1: 2,5 og 1:15. Magn kísilgelsins sem notað er sem kyrrstætt áfanga við sýnishorn er um það bil 20 til 40 sinnum meiri en sýnisins. Staðallinn fyrir val á dálkum ætti að byggjast á TLC plötunni klifurástandi sýnisins. Ef það eru mörg óhreinindi í nálægð, reyndu að velja stærri dálk eins mikið og mögulegt er, svo að hægt sé að hylja sýnið þitt með litlu þunnu lagi (ráðlagður þykkt undir 5mm). Ef óhreinindin eru langt í burtu er náttúrulega hægt að auka þessa þykkt, en ekki er mælt með því að þykkt sýnisins fari yfir 2 cm, nema varan sé einfaldlega þvegin.
Margir gera mistök við að hugsa um að bæta við meira kísill, jafnvel þó að það sé þykkara á sýninu mínu, er það hægt að skilja það vel? Þetta svar er neikvætt!
Ástæðan er sú að þetta fólk hélt aldrei að sýnin hér að neðan og hér að ofan væru ekki að keyra á sömu línu, svo þau gætu aðeins fengið einhverja hreina, sem flest voru yfir, svo ekki væri minnst á óhreina, sóa tíma og leysi!
Þess vegna þarf sýnið að þynna!
Eftir að hafa valið dálkinn er hægt að bæta við kísill með fóðrunartrekt. Vertu viss um að vera með grímu og starfa í fume hettu. Ástæðan fyrir þessu verður ekki útfærð af bloggaranum (kísilbyssu).
Hvað varðar síast kísilgel, þá er ráðlagt ferli: í fyrsta lagi, settu kísilgelsúluna með kísilgelinu sem sett er lóðrétt, fletjið yfirborð kísilgelsins með hendinni, tengdu botninn á kísilgelasúlunni við vatnsdælu, dældu út kísilgelinu og helltu síðan í minnsta skautunarflugi að ofan. Þegar skolefnið er að fara að leka út skaltu loka lokunarlokanum til að koma í veg fyrir að leysir sé dælt í vatnsdælu.
Síðan, undir þrýstingi, er hægt að liggja í bleyti á kísill hlaupinu með því að skola sjö eða átta súlurúmmál með minnsta magni þróunarlyfsins.
Sýnishorn hér að ofan
Sýnataka er skipt í blaut sýnatöku og þurr sýnatöku.
(1) Blaut sýnatöku.
Ráðlögð aðferð er að nota pípettu með gúmmíauppi til að sjúga sýnið, nálægt efsta hlutanum á kísill hlaupinu, hægt og jafnt og dreypa sýninu þar til það hylur lag, hættu síðan að bæta sýninu og beita smá þrýstingi til að sökkva feita efninu í kísill hlauplagið; Sökkva feita efninu í kísilllagið og endurtaktu þetta ferli margfalt þar til öll sýni eru hlaðin!
Sumir nýir nemendur geta verið forvitnir hvers vegna þessi aðgerð er framkvæmd í stað þess að húða blautu ferliðolíu eins og efni í einu?
Reyndar getur þessi aðgerð dregið úr virkri hæð sýnislagsins. Á þessum tímapunkti er súlu litskiljun þegar hafin og sýni í kjölfarið eru eins og leysir sem ýta fyrri sýnunum til aðsogs og desorb í kísilgeli.
(2) Hvað varðar þurr sýnatöku.
Ekki er mælt með því að það sé ekki mælt með því. Mælt er með traustum sýnum til að berja eða kristallað. Mælt er með „samviskusömum aðferðum, etýlasetat vs. vatni, ultrasonic sveiflum aðstoðar kristöllun á mikilli sjóðandi olíu“ og „að deila rannsóknarstofu endurkristöllunaraðferð“.
Þurr sýnatöku hefur yfirleitt með tveimur vandamálum; Annars vegar, meðan á sýnishorninu stóð, eykst möguleikinn á viðbrögðum milli sýnisins og kísilgelsins vegna þess að þörf er á að hækka hitastigið fyrir uppgufun snúnings; Aftur á móti þýðir þurrhleðsla að aðsogsefni verða sett inn í sýnislagið og eykur hæð sýnislagsins eða stærð dálksins, sem þarfnast meiri tíma og meira leysi.
Ef það er ekkert annað val skaltu einfaldlega hella aðsoguðu duftinu hægt í súluna til að hlaða, með nokkrum kröfum svipað og blautum aðferðum.
Bætið vatnsfríu natríumsúlfati eða kvars sand
Til að forðast að hafa áhrif á sýnislagið við bætt við skolun, sem veldur ójafnleika, aflögun og áhrifum á skilvirkni aðskilnaðar er yfirleitt lagt lag af vatnsfríu natríumsúlfati eða kvarsanda ofan á sýnishornið.
Verkfræðingar okkar kjósa persónulega að leggja vatnsfrítt natríumsúlfat vegna þess að það hefur einnig þurrkunaraðgerð og er vingjarnlegt við leysiefni eins og díklórmetan, sem eru viðkvæm fyrir sveiflum, hita frásog og þéttingu!
Gradient skolun, sýnatöku og söfnun
Eftir að hafa hlaðið, skolaðu fyrst dálkinn með litlum skautaðri leysi (leysir sem mun ekki leyfa vörunni að fara í gegnum) fyrir 2-3 súlurrúmmál (eitt dálka rúmmál er skilgreint sem rúmmál farsímafasans sem streymir inn og út) til að tryggja einsleitni og veldu síðan hlutfalli fyrir skolun.
Hvernig á að velja skolunina sem liggur í gegnum dálkinn?
Hlutfall skolunar er hlutfallið þegar varan þín nær RF gildi um það bil 0. 2 á TLC plötunni
Þetta er reynslan af dálkþvotti sem ég hef lesið margar bækur og deilt og raunverulegt ferli er líka mjög svipað. Persónulega vil ég frekar draga úr halla um tvisvar.
Til dæmis, ef leysirinn fyrir TLC plötuklifur er pe/ea =2: 1, er líklegra að bloggarinn hefjist hallandi skolun frá pe/ea =4: 1 og endi á pe/ea =2: 1, sem almennt leiðir til betri árangurs.
Það eru líka aðferðir við að safna skolun. Þú getur fyrst valið stærra prófunarrör til að taka á móti því og þegar TLC nálgast markmiðspunktinn skaltu skipta yfir í minni prófunarrör. Þetta getur dregið úr möguleikanum á að fá meira og forðast óhreinindi.
Ef þú lendir í aðstæðum þar sem óhreinindi stig og vörustig eru þétt saman, sérstaklega þeir sem eru með veika flúrljómun, mundu að beita ekki þrýstingi. Veldu í staðinn að koma dálknum undir venjulegan þrýsting og breyta slöngunni í hvert skipti sem helmingur eða minna rör eru tengd, sem getur einnig aukið hreinsunarlíkurnar.
Mundu að höndla ekki súluna tímanlega!
Margir hafa þann sið að gera ráð fyrir að súlan hafi verið liðin og þurrkuð þegar engin vara er í einni eða tveimur rörum eftir TLC á síðari stigum.
Ég áttaði mig aðeins á því að ávöxtunin var of lág þegar ég reiknaði það út, eða þegar ég fór að búa til litróf komst ég að því að litrófið var rangt og missti af röngum punkti. Ég harma það djúpt.
Svo það er mælt með því að þú flýtir þér ekki að vinna úr súlunni eftir að hafa lokið viðkomandi punkti. Í staðinn skaltu framkvæma kjarnorku segulómun til að passa við ávöxtunina fyrir vinnslu.
Ef þú ert upptekinn eða að flýta þér að hreinsa önnur efnasambönd með þessuHefðbundin súlu litskiljun, það er mælt með því að skola með mikilli pólun góðkynja blandaðri leysi og láta þennan hluta skolunarinnar sérstaklega til að bera kennsl á niðurstöður.
maq per Qat: Hefðbundin súlu litskiljun, Kína hefðbundin súlu litskiljun framleiðendur, birgjar, verksmiðja
chopmeH
Lítill litskiljunarsúlaHringdu í okkur
